2020年4月1日，我校教师陈龙欣博士以第一作者身份在Science子刊《Science Advances》上发表了题为“Epitope-directed antibody selection by site-specific photocrosslinking”的长篇研究论文。该研究是在我校分子生物学实验室马润林团队和中国科学院生物物理研究所王峰团队合作下完成的，该研究提供了一种高效的针对精准靶向表位的单克隆抗体药物筛选新技术，有望拓宽或迭代抗体药物研发管线。

治疗用的单克隆抗体药物通常需要与抗原的特定靶向表位结合才能发挥其功能。到目前为止，没有任何一种有效策略能够快速并简单的建立筛选和识别与抗原的特定构象表位结合的单克隆抗体的方法。在本研究中，我们开发了一种精准靶向表位尤其是空间构象表位的单克隆抗体药物的筛选策略，即：在任何感兴趣的抗原表位上，通过基因编码的具有光交联活性的非天然氨基酸嵌入到靶标抗原中，利用抗体噬菌体展示文库进行一轮或两轮淘选，在长波长紫外光活化后，嵌有非天然氨基酸的抗原表位（靶标）与表位特异性抗体（噬菌体展示抗体）共价结合的方式得到富集，最终筛选到抗原表位特异性抗体药物。

在本方法中，我们选择具有光交联活性的对苯甲酰苯丙氨酸（p-benzoyl-L-phenylalanine, pBpa）通过基因编码的密码子扩展技术单一位点的嵌入到需要筛选的特定抗原表位中及其周边，然后加入噬菌体展示抗体文库孵育并UV照射后，嵌入在抗原特异性表位上的pBpa与其空间距离邻近的抗体上的氨基酸发生共价键的连接，然后进行一轮或两轮的筛选，最终获得表位特异性的单克隆抗体药物。用这种新方法鉴定出的抗体至少有三分之一能与抗原表位结合，更大优点是：快速、精准靶向表位、有能力筛选出常规筛选方法难以获得的功能性抗体。这将为针对GPCR或离子通道等膜蛋白的复杂空间构象抗原提供另外一种新型的筛选抗体药物策略。

图 噬菌体展示抗体文库的表位定向抗体药物筛选策略示意图

该研究得到国家重点研发计划、中科院战略重点研究计划、中科院“百人计划”、郑州师范学院科研专项等基金的资助。

文章链接：https://advances.sciencemag.org/content/6/14/eaaz7825